Mikroskopiskās metodes Mikrobioloģijas

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. Mikroskopiskās pētīšanas metodes ir veidi, lai izpētītu dažādus objektus ar, izmantojot īpašu aprīkojumu. Tas ļauj mums apsvērt struktūru vielu un organismu, kura apjoms ir ārpus robežas cilvēka acs izšķirtspēju. Rakstā sniedz īsu analīzi par mikroskopiskās metodes.

Pārskats

используют в своей практике разные специалисты. Mūsdienu metodes mikroskopiskās pārbaudes, izmantojot dažādus ekspertus savā praksē. Starp tiem ir virusologiem, citoloģija, hematoloģija, morfoloģijas, un citi. Galvenās metodes mikroskopiskā izmeklēšana ir zināms jau ilgu laiku. Pirmais ir viegls veids, kā skatoties uz objektiem. Pēdējos gados, aktīvi ieviesta praksē, un citām tehnoloģijām. . Tādējādi popularitāte ieguvis fāzes kontrasta, luminiscentās, iejaukšanās, polarizācijas, infrasarkano, ultravioleto, stereoskopisks pētniecības metodi. Visi no tiem ir balstīti uz dažādiem īpašības gaismas. . Turklāt, plaši izmanto elektronu mikroskopijas metodes. Šīs metodes ļauj parādīt objektus, izmantojot virziena plūsmu lādētu daļiņu. Jāatzīmē, ka šīs mācību metodes tiek izmantotas ne tikai bioloģijā un medicīnā. в промышленности. Diezgan populāra metode mikroskopisko izpēti metālu un to sakausējumu nozarē. Tas ļauj pētījumu, lai novērtētu uzvedību savienojumu, lai ražotu tehnoloģiju, lai mazinātu varbūtību lūzumu un palielinātu izturību.

Gaismas veidos: raksturojums

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Šādas mikroskopiskās metodes pētot mikroorganismu un citas iekārtas, kas pamatojas uz dažādiem izšķirtspējas iekārtām. Svarīgs faktors šis ir virziens staru īpašības pašu objektu. Pēdējais, jo īpaši, var būt caurspīdīga vai necaurspīdīga. Saskaņā ar īpašībām objekta, mainās fizikālās īpašības gaismas plūsmu - spilgtumu un krāsu dēļ uz amplitūdu un viļņa garumu, lidmašīnu, posmā un virzienā viļņu izplatīšanās. . Par šo īpašību izmantošanu un veidot dažādas mikroskopiskās metodes.

specifika

Izpētīt veidus gaismas objektus, kas parasti krāso. Tas dod iespēju noteikt un aprakstīt šos vai citus rekvizītus. Ir nepieciešams, ka audi ir noteikta, jo krāsviela atklāj dažus struktūras tikai šūnās nogalināja. Jo dzīves šūnas atdala krāsu formā vacuoles citoplazmā. Viņa nav glezno pār struktūru. Bet ar dzīviem objektiem, un to var izmeklēt, izmantojot gaismas mikroskopu. Šim nolūkam, būtiska mācīšanās veidu. Šādos gadījumos Darkfield kondensators. Tā tiek iestrādāta gaismas mikroskopā.

Studēšana Nekrāsota objekti

To veic ar fāzu kontrasta mikroskopu. Šī metode ir balstīta uz difrakcijas stara atbilstoši raksturlielumiem objekta. iedarbības laikā atzīmēti pārmaiņas fāzē un viļņa garumu. In mikroskopa lēca ir klāt caurspīdīgs plate. Live vai fiksēta, bet ne krāsotas objektus, pateicoties tās pārskatāmību, gandrīz nemaina krāsu, un amplitūda stara caur tiem, izraisot tikai pāreju no viļņu fāzes. Bet šajā gadījumā, pēc tam, kad iet caur objektu, gaismas plūsmas novirza uz šķīvja. Tā rezultātā, starp sijām, trūkst caur objektu un noslēdzot gaiša fona, viļņa garuma atšķirība rodas. Pie noteiktu vērtību vizuālo efektu notiek - tumšs objekts būs skaidri redzams uz gaiša fona vai otrādi (saskaņā ar īpašībām fāzes plāksnes). Lai iegūtu šī starpība būtu vismaz 1/4 viļņa garums.

Anoptralny metode

Viņš ir sava veida fāzu kontrasta metodi. Anoptralny metode ietver izmantošanu lēca ar speciālām plāksnēm, kas maina tikai krāsu un spilgtumu apkārtējās vides gaismas. Tas ievērojami paplašina iespējas mācīties Nevainojama dzīves objektiem. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. Applied fāzes kontrasta mikroskops metode pētījumi mikrobioloģijā, parazitoloģija pētījumā par augu un dzīvnieku šūnās, vienšūņiem. Jo hematoloģijas metode tiek izmantota, lai aprēķinātu un noteikt diferenciāciju asins šūnu un kaulu smadzenēs.

interferences metodes

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Šīs mikroskopiskās izpētes metodes parasti atrisināt tādas pašas problēmas kā fāzes kontrastu. Tomēr pēdējā gadījumā, eksperti var novērot tikai kontūras objektiem. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Traucējumu mikroskopiskas pētīšanas metodes ļauj mums mācīties no savas puses, veiktu kvantitatīvu novērtēšanu elementi. Tas ir iespējams tāpēc, ka sadalīšana gaismas staru. Viena plūsma iet caur daļiņu objektu, un otrs - par. Jo okulārs mikroskopa viņi satiekas un traucēt. Rezultātā fāzes starpība var noteikt ar dažādu šūnu struktūrām svara. Kad secīgs mērījums ir ar iepriekš atstarošanas indeksu var iestatīt bieza nefiksēto audus un dzīvojamo objektu, olbaltumvielu saturu vai tajā, koncentrāciju cietās vielas un ūdens, un tā tālāk. Saskaņā ar saņemto datu speciālistiem ir iespēja netieši novērtēt membrānas caurlaidība, fermentu aktivitāti, šūnu vielmaiņu.

polarizācija

Tas tiek veikts, izmantojot Nicol prizmām vai miglains polaroids. Tie ir novietoti starp paraugu un gaismas avotu. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Polarizācijas mikroskopija metode pētniecībai mikrobioloģijas ļauj pētīt objektus ar inhomogeneous īpašībām. Jo izotropas struktūras ātruma gaismas izplatībai ir neatkarīga no izvēlētā plaknē. Jo anizotropām sistēmu likme mainās atkarībā no gaismas orientēta gar šķērsenisko vai garenisko asi objektu. Ja refrakcijas indeksa vērtība gar struktūra būs lielāks nekā gar šķērsvirzienā, rada pozitīvu dubultu refrakcija. Tas ir tipisks daudziem bioloģiskajiem objektiem, kas ir atraduši stingru molekulāro orientāciju. Viņi visi ir anizotrops. Šajā kategorijā jo īpaši miofibrilla, neurofibrils, skropstas ar ciliated epitēlijā, kolagēna šķiedras, un citi.

polarizācija vērtība

Salīdzinot starojuma raksturu un refrakcijas indeksa anizotropiju objekta ļauj novērtēt molekulāro struktūru organizācijā. Polarizācija metode kalpo kā viens no histoloģiskās analīzes metodēm, ko izmanto citoloģijas un tā tālāk. Ne tikai krāsotas objektus var pētīta gaismā. Polarizācija metode ļauj pārbaudīt Nevainojama un nenofiksēta - dzimtā - preparāti Audu sadaļās.

luminiscences metodes

Tie ir balstīti uz īpašībām konkrētu objektu dot spīd zili violeta daļu radiofrekvenču spektra vai UV stariem. Daudzas vielas, piemēram, olbaltumvielu, dažu vitamīnu, coenzymes, narkotikas, ir nodrošinātas ar primāro (en) luminiscenci. Citi objekti sāk kvēlot, pievienojot fluorhroma - īpašas krāsas. Šīs piedevas ir selektīvi difūzu vai sadalīti atsevišķos šūnu struktūrām vai ķīmisko savienojumu. Šis īpašums bija pamats izmantošanas dienasgaismas mikroskopu ar histochemical un citoloģisko pētījumiem.

Izmantošanas jomas

Izmantojot imūndepresiju-fluorescences speciālisti atklāt vīrusu antigēnus un to koncentrācija koriģē tiek identificēti vīrusi anti struktūrās un antigēnus, hormoni, dažādu vielmaiņas produktu un tā tālāk. Šajā sakarā, diagnoze herpes, cūciņu, B hepatītu, gripu un citām infekcijām, izmantojot luminiscences metodes materiālu pētījumiem. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Mikroskopiskās imūndepresiju luminiscējoša metode nosaka audzēja ļaundabīgo audzēju, noteikt išēmisko sirds apvidus, kas ir agrīnā stadijā sirdslēkmes un tā tālāk.

No ultravioleto lietošana

Tā ir balstīta uz spēju vairāku vielu dzīves šūnas vai mikroorganismi tiek fiksētas, bet uncolored caurspīdīgai redzamo gaismas audumi absorbē UV starus konkrēta viļņa garumu. Tas attiecas jo īpaši augstu molekulāro savienojumu. Tie ietver olbaltumvielas, aromātiskās skābes (methylalanine, triptofāna, tirozīna, utt), nukleīnskābju un purīna bāzi piramidinovye un tā tālāk. UV mikroskopija ļauj noteikt atrašanās vietu un skaitu, šo savienojumu. Šajā pētījumā par dzīves lietām speciālisti var novērot izmaiņas savos vielmaiņas procesiem.

papildus

Infrasarkanais mikroskopija tiek izmantots pētījumā, ir necaurspīdīgs gaismas un ultravioletie stari caur absorbcijas objektu plūsmas struktūras, kuru viļņa garums 750-1200 nm. Lai izmantotu šo metodi, nav vajadzības iepriekš pakļaut narkotikas, lai ķīmisko apstrādi. Parasti IR metode tiek izmantota antropoloģija, zooloģija un citu zinātņu nozarē. Attiecībā uz zālēm, šī metode tiek izmantota galvenokārt oftalmoloģijā un Neuromorphology. Pētījuma dimensiju objektus, izmantojot stereoskopisko mikroskopu. aparatūras dizains ļauj uzraudzīt kreiso un labo aci citā leņķī. Necaurlaidīgiem priekšmetiem tiek pētīta pie relatīvi zema palielinājuma (120 reizes ne vairāk). Stereoskopisks metodes tiek izmantotas mikroķirurģijas, Pathomorphology tiesu medicīnā.

elektronu mikroskopija

To izmanto, lai pētītu struktūru šūnām un audiem ar makromolekulāro un subcellular līmenī. Elektronu mikroskopija ļauj mums veikt kvalitatīvu lēcienu pētniecības jomā. Šī metode tiek plaši izmantota bioķīmijā, onkoloģijas, virusoloģija, morfoloģijas, imunoloģijā, ģenētikā un citās jomās. Ievērojami palielināsies rezolūcijā iekārtu jaudas plūsmas elektroniem, kas ved cauri vakuuma elektromagnētiskā laukā. Pēdējais, savukārt, rada īpašas lēcas. Elektroni ir iespēja iziet cauri struktūru objekta vai atspoguļots no tiem ar novirzēm no dažādiem leņķiem. Rezultāts tiek parādīts uz fluorescèjoøâ ekrâna ierīces. Ja pārraides mikroskopija plakana skats iegūst skenējot attiecīgi surround.

priekšzināšanas

Ir vērts atzīmēt, ka pirms caurlaides elektronisko mikroskopiskās pārbaudes, objekts ir pakļauts īpašu apmācību. Jo īpaši, izmantojot fizisku vai ķīmisku fiksācijas audu un organismu. Šķērsgriezuma biopsijas materiāls un, turklāt, atūdeņo, ir iestrādāts epoksīda sveķiem, kristāls vai dimanta nažiem uz ultrathin sekcijām. Tad to kontrastu un izpēte. Skenēšanas mikroskops pārbauda virsmas objektiem. Lai to izdarītu, tie apsmidzina īpašu vielu vakuuma kamerā.